كيفية إعداد أنبوب الطرد المركزي المخروطي المعقم

Zhejiang SAINING Biotechnology Co., Ltd.. أنابيب الطرد المركزي المخروطية المعقمة عالية الكثافة، والمصنوعة من مادة البولي بروبيلين، للاستخدام مرة واحدة، هي أداة متعددة الاستخدامات لطرد الخلايا المركزي والتحبيب. تُصنع هذه الأنابيب المخروطية القاع من مادة البولي بروبيلين في منشآت حاصلة على شهادة ISO 13485:2012، وتتميز بأغطية سدادة تقليدية من البولي إيثيلين. صُممت هذه الأنابيب لضمان وضوح عالٍ ومتانة وسهولة في الاستخدام.
قبل استخدام أنبوب الطرد المركزي المخروطي، يجب التأكد من قدرته على تحمل الضغط المطلوب أثناء الطرد المركزي. ولمنع أي اختلاط، من المهم تحديد مستوى التعبئة وتجنب خلع الغطاء أثناء الاستخدام.
في تطبيقات زراعة الخلايا، تُستخدم أنابيب الطرد المركزي المخروطية المعقمة. يتميز هذا النوع من الأنابيب بعملية تصنيع عالية القوة، وهو مصمم لتوفير ثبات أكبر في درجة الحرارة. لتحضير أنبوب طرد مركزي مخروطي، اتبع الخطوات الموضحة أدناه.
أضف الحجم الصحيح من وسط تدرج الكثافة إلى كل أنبوب طرد مركزي مخروطي معقم. تتوفر وسائط تدرج الكثافة بمجموعة متنوعة من الوسائط، بما في ذلك محلول هانكس المتوازن الملحي (HBSS) ومحلول PBS. كلاهما محاليل ملحية ولا يحتويان على الكالسيوم أو المغنيسيوم. ومع ذلك، يُعد محلول HBSS مناسبًا لأنه أقل حمضية من محلول PBS.
بعد ذلك، يُخفف الدم ووسط الفصل الأولي باستخدام محلول WDR. بعد التخفيف، يُنقل العينة إلى أنبوب الطرد المركزي المخروطي المعقم. إذا لم يُخفف الدم، ستظهر البلازما أسفل طبقة تدرج الكثافة وقد يصعب فصلها. كبديل، إذا خُففت البلازما بالكامل، يُمكن فصل خلايا الدم الحمراء المحيطية (PBMCs) عن البلازما.
وأخيرًا، يُجمع الغلافات الباهتة وأشرطة البكتيريا العاثية في أنبوب طرد مركزي مخروطي واحد سعة 50 مل. يُلصق على الأنبوب رقم PTID والأحرف الأولى من اسم الفني. بعد إعادة طرد العينة مركزيًا، تُزال أشرطة البكتيريا العاثية وتُتخلص من السائل الطافي. للحفاظ على سلامة العينة، يُنصح باتباع بروتوكول خاص بالكواشف، مثل طريقة التبطين. تعتمد هذه الطريقة على قوة الجاذبية بين الطبقتين وتُكوّن تكتلات. كما تتوفر طرق أخرى، مثل التبطين اليدوي.
ولتقليل احتمالية الاختلاط، يُنصح بتمرير أنبوب الدم الأولي فوق وسط تدرج الكثافة. يجب سحب الدم ومحلول وسط تدرج الكثافة ببطء ورفق.
إذا لم يتحمل أنبوب الطرد المركزي المخروطي ضغط العينة، يُمكن استخدام أنبوب إعادة الطرد المركزي. تأكد من تعقيم أنبوب إعادة الطرد المركزي وقدرته على تحمل الضغط. يُنصح بالحفاظ على أنبوب إعادة الطرد المركزي في درجة حرارة الغرفة بين كل استخدام. أو يُمكن تخزين أنبوب إعادة الطرد المركزي في درجة حرارة منخفضة. خلال دورة التجميد والذوبان، يجب أن تكون درجة حرارة جهاز إعادة الطرد المركزي بين 2 و8 درجات مئوية.
بعد تخفيف الدم، يُمكن إضافة محلول WDR إليه لزيادة حجمه. يمكنك أيضًا تقسيم المحلول المخفف إلى أجزاء صغيرة في أنابيب الطرد المركزي المخروطية المعقمة. أضف 0.1 مل من محلول WDR لكل 10 مل من الدم.
كما يجب تدوين رقم تعريف PTID على جميع أنابيب الدم المُستقبَلة. سيساعد استخدام رقم تعريف PTID على تقليل أي تلوث متبادل. كما يمكنك تمييز كل رقم تعريف PTID بعلامات ملونة مختلفة لتجنب الالتباس.

أنبوب الطرد المركزي

رقم المتغير	نموذج	RCF	تعقيم	قاع	مواصفات الحزمة
3030001	15 مل	12000xg	نعم	القاع المخروط	50 كيس، 10 أكياس/علبة
3030002	15 مل	12000xg	نعم	القاع المخروط	50 رف إسفنجي، 10 رفوف/علبة
3031001	50 مل	12000xg	نعم	القاع المخروط	25 كيس، 20 كيسًا/علبة
3031002	50 مل	12000xg	نعم	القاع المخروط	25 رف إسفنجي، 20 رفًا/علبة