تُستخدم قوارير زراعة الخلايا عادةً لزراعة مجموعة واسعة من الكائنات الحية، بما في ذلك الفطريات والبكتيريا والفيروسات. يمكن أن تكون هذه الكائنات الحية الدقيقة ضارة بالإنسان، لذلك يتم معالجة هذه القوارير غالبًا لتقليل نموها. قارورة زراعة الخلايا Saining هي أحد أنواع المعالجة السطحية التي يتم تطبيقها على قوارير كبيرة تبلغ مساحتها 175 سم2. بالإضافة إلى ذلك، فهو متوفر أيضًا بأحجام أكبر مثل قوارير بحجم 225 سم2.
البوليسترين
للحفاظ على سلامة تجربة زراعة الخلايا، من الضروري اختيار الوعاء المناسب. للحصول على النتائج، يجب أن تكون القارورة خالية من الملوثات. وهذا يعني أنه لا يمكن أن يحتوي على أي مواد يمكن أن تضر بتجربة زراعة الخلايا، مثل مرض جنون البقر ومرض جنون البقر. يعد البوليسترين خيارًا شائعًا لأوعية زراعة الخلايا لأنه يوفر قابلية التشكيل والوظيفة.
تاريخياً، كان البوليسترين هو الركيزة الأساسية لثقافة الخلايا الملتصقة. لكن للبوليسترين فوائد أخرى إلى جانب خصائصه الكارهة للماء. على سبيل المثال، يمكن معالجته لجعله محبًا للماء وشحنته سالبة. هذه الخاصية مفيدة لمجموعة واسعة من التطبيقات المخبرية، بما في ذلك زراعة الأنسجة والبيولوجيا الجزيئية. علاوة على ذلك، فهو غير سام، مما يجعله مثاليًا للخلايا المزروعة.
يمكن معالجة سطح البوليسترين لتحسين ارتباط الخلايا وهجرتها. تتم معالجة السطح عن طريق طلاءه بالسكريات أو البروتينات. هذا الطلاء مفيد بشكل خاص عند استخدام حالة خالية من المصل. نظرًا لأن المصل يحتوي عادةً على بروتينات مرفقة مثل فيبرونكتين، فإن العديد من أنواع الخلايا تكافح من أجل الارتباط بأسطح البوليسترين. مع هذه التعديلات، أصبحت أسطح البوليسترين أكثر ملاءمة لزراعة الخلايا.
بلازما غاز الفراغ
تواجه الخلايا صعوبة في الالتصاق بمادة البوليسترين، وهي مادة شائعة الاستخدام في أدوات المختبرات. للتغلب على هذه المشكلة، يجب تعديل سطح دورق البوليسترين ليكون محبًا للماء. يمكن أن تؤدي معالجة بلازما الغاز الفراغي (VGP)، وهي عملية خاصة، إلى تحقيق كيمياء سطحية موحدة تعمل على تحسين ارتباط الخلايا.
تتميز قوارير زراعة الخلايا بمعالجة بلازما الغاز الفراغي، مما يساعد على زيادة ارتباط الخلايا ونموها. تحتوي هذه القوارير على شريط سحب مناسب لسهولة الفتح. يوفر ab القابل للإغلاق الحماية ضد التلوث. تعتبر معالجة بلازما الغاز الفراغي أيضًا خيارًا جيدًا للتعقيم. أنها آمنة للخلايا الموجودة في القارورة، ويقلل من مخاطر التلوث.
VGP هي تقنية قوية تضيف طبقات عازلة كيميائية إلى سطح معدات المختبر. تعتبر هذه العملية بديلاً رائعًا للطلاء السائل، حيث أن أيونات VGP لا تذيب البلاستيك وبالتالي فهي غير تفاعلية. بالإضافة إلى ذلك، يوفر العلاج بالبلازما مرونة في الوظائف الكيميائية. إذا كنت تقوم بإعداد قوارير زراعة الخلايا للمختبر، ففكر في استخدام هذه التقنية. سيعزز تجاربك ويحسن جودة النتائج.
تتم معالجة قوارير زراعة خلايا البوليسترين ببلازما الغاز الفراغي لجعلها مناسبة لنمو الخلايا. بالإضافة إلى ذلك، فهي مصنوعة بأغطية خاصة لمنع التسرب والجوع. كما أنها مصممة بفم كبير، حتى تتمكن من إدخال مكشطة الخلايا بسهولة. سيضمن هذا العلاج نتائج عالية الجودة ويقلل من مخاطر التلوث.
بولي ليسين
يتم استخدام سلسلة من الأحماض الأمينية موجبة الشحنة، بولي-L-ليسين كطلاء على قوارير وألواح زراعة الخلايا. لقد وجد أنه يعزز التصاق الخلايا ويزيد من عدد مواقع ربط الخلايا ذات الشحنة الموجبة. يعزز هذا العلاج أيضًا نمو وبقاء الخلايا العصبية الأولية في الثقافة. ومع ذلك، قبل أن يتم استخدامه لزراعة الخلايا، من المهم معرفة الظروف الصحيحة لكل خط خلية وتطبيق.
طلاء Poly-D-lysine غير فعال عند تحضيره بالماء المقطر. يجب أن يكون للمحلول درجة حموضة تتراوح بين 3.3-6.6. يوصى باستخدام محلول يحتوي على محلول بورات 8.5 لتحسين كفاءة الطلاء. بمجرد طلاء البولي-د-ليسين، يجب شطفه جيدًا في وسط جديد لإزالة أي طلاء متبقي.
تتمثل إحدى طرق طلاء البلاستيك والأواني الزجاجية بالبولي-د-ليسين في استخدام محلول ذو وزن جزيئي يتراوح بين 70-150 كيلو كيلو جرام. يتم تخفيف هذا المحلول إلى 50 ميكروغرام لكل مل ويطبق على سطح دورق الثقافة. ثم يتم تحضين دورق الثقافة في درجة حرارة الغرفة لمدة 5 دقائق.